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二甲基亚砜现货的使用说明

2021-03-25 09:32:02

制备二甲基亚砜现货DMSO溶液用来冷冻细胞的步骤如下:


1. 配制含10%DMSO、10%-20%胎牛血清的冻存培养液;


2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。


3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;


4. 以1000rpm的转速离心处理5分钟;


5. 去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/mL-1×107/mL;


6. 将细胞分装入冻存管中,每管1mL-1.5 mL;

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7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;


8. 标准的冻存程序为:以-1~-2℃/ min的降温速率进行降温;当温度达到-25℃以下时,降温速率可增至-5℃~-10℃/min;当温度达到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h小时,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。


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